性激素放免檢測(cè)試劑盒使用說明

更新時(shí)間：2018-11-10

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　　性激素放免檢測(cè)試劑盒使用說明

　　1.樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：(注意：樣品裂解需在4℃或冰上操作)

　　對(duì)于貼壁細(xì)胞：

　　吸除培養(yǎng)液，按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例(即相當(dāng)于細(xì)胞培養(yǎng)液量2毫升的1/10)加入裂解液，裂解細(xì)胞。裂解細(xì)胞時(shí)為了裂解充分，可以使用移液器進(jìn)行反復(fù)吹打或晃動(dòng)培養(yǎng)板使裂解液充分接觸并裂解細(xì)胞。通常細(xì)胞在接觸裂解液后會(huì)立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。

　　對(duì)于懸浮細(xì)胞：

　　用離心管離心沉淀細(xì)胞，棄上清，輕輕彈散細(xì)胞，按照6孔板每孔的細(xì)胞量加入200微升裂解液的比例加入裂解液，裂解細(xì)胞。裂解細(xì)胞時(shí)為了裂解充分可以彈擊離心管管底或適當(dāng)Vortex使裂解液充分接觸并裂解細(xì)胞。通常細(xì)胞在接觸裂解液后會(huì)立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。

　　對(duì)于組織樣品：

　　按照每20毫克組織加入約100-200微升裂解液的比例加入裂解液，然后用玻璃勻漿器或其它勻漿器進(jìn)行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。

　　2.標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的準(zhǔn)備：

　　冰浴上溶解待用試劑，把ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液用ATP檢測(cè)裂解液稀釋成適當(dāng)?shù)臐舛忍荻?。具體的濃度需根據(jù)樣品中ATP的濃度而定。初次檢測(cè)可以檢測(cè)0.1、1和10微摩爾/升這幾個(gè)濃度，在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中更據(jù)樣品中ATP的濃度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。

　　3.ATP檢測(cè)工作液的配制：

　　按照每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品需100微升ATP檢測(cè)工作液的比例配制適當(dāng)量的ATP檢測(cè)工作液。把待用試劑在冰浴上溶解。取適當(dāng)量的ATP檢測(cè)試劑，按照1:100的比例用ATP檢測(cè)試劑稀釋液稀釋ATP檢測(cè)試劑。例如50微升ATP檢測(cè)試劑可以加入5毫升ATP檢測(cè)試劑稀釋液配制成5毫升ATP檢測(cè)工作液。稀釋后的ATP檢測(cè)試劑即為用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的ATP檢測(cè)工作液。ATP檢測(cè)工作液可在冰浴上暫時(shí)保存。

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