問(wèn)：我之前定購(gòu)了大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒，檢測(cè)血清的。我現(xiàn)在想再訂購(gòu)一盒，用于檢測(cè)細(xì)胞，可以嗎？

答：大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒可以檢測(cè)大鼠血清，血漿，細(xì)胞上清液，細(xì)胞裂解液等樣本。

問(wèn)：如果我的樣本里面含有*，可以檢測(cè)嗎。

答：疊氮鈉會(huì)影響HRP的活性，對(duì)整體檢測(cè)有干擾，不適合ELISA方法了。
   一般細(xì)胞裂解液不可能含有疊氮鈉，但如果樣本中含有疊氮鈉，不能做ELISA實(shí)驗(yàn)的，如果要用elisa檢測(cè) 就只能重新裂解

問(wèn)：那細(xì)胞裂解方法是怎么樣的呢，加入什么試劑？

答：1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。

2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。

對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。

3. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

裂解液用量說(shuō)明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。