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標(biāo)題《腸道病毒71型VP1抗原表位多肽疫苗的實(shí)驗(yàn)研究》

摘要：目的根據(jù)貴州省手足口病患兒腸道病毒71型(EV71)分離株的VP1結(jié)構(gòu)蛋白序列研制多肽疫苗并研究其對(duì)小鼠的免疫保護(hù)作用。方法 2013年3月1日至2015年12月31日從貴州省手足口病患兒的咽拭子樣本中分離到17株EV71毒株,其VP1氨基酸序列一致(共297個(gè)氨基酸),據(jù)此設(shè)計(jì)并合成多肽片段(除最后一段為27個(gè)氨基酸外,其余均為20個(gè)氨基酸);用感染EV71的手足口病病愈患兒的陽(yáng)性血清,通過(guò)間接ELISA法篩選出免疫原性較好的多肽片段,制成多肽疫苗;用多肽疫苗免疫ICR健康雌鼠,并設(shè)未免疫的對(duì)照(Con);將雌鼠的子代小鼠隨機(jī)分為注射和不注射EV71病毒顆粒的2個(gè)亞組;注射病毒2 d后處死所有小鼠,分別取小鼠的骨骼肌、小腸和腦組織,通過(guò)RT-PCR檢測(cè)病毒感染情況,同時(shí)HE染色后在顯微鏡下觀察病理改變。結(jié)果共設(shè)計(jì)并合成19段含交叉序列的多肽片段,從中篩選出3段免疫原性較好的(P2:VSRALTHALPAPTGQNTQVS;P4:ALQAAEIGASSNASDESMIE;P8:YANWDIDITGYAQMRRKVEL),制成多肽疫苗并免疫雌鼠,取雌鼠的子代小鼠進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。RT-PCR...

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